化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)中，我們需要用吖啶酯先標(biāo)記上抗體蛋白，才能在免疫反應(yīng)后對(duì)待測(cè)物進(jìn)行檢測(cè)，因此如何標(biāo)記抗體就非常的關(guān)鍵了，吖啶酯類化合物已被廣泛證明為非常有用的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物，其穩(wěn)定性、標(biāo)記特異性和檢測(cè)靈敏度都超越放射性同位素。

吖啶酯發(fā)光標(biāo)記原理：

在堿性條件下，NHS 作為離去基團(tuán)被取代，蛋白質(zhì)與吖啶酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)完成后，多余的吖啶鹽通過(guò)脫鹽柱除去。在堿性過(guò)氧化氫存在下，吖啶標(biāo)記的蛋白不需要酶催化就可自行發(fā)光。

激發(fā)液的加入 導(dǎo)致反應(yīng)體系立即釋放約 430 nm 的光子，通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)光度計(jì)（luminometer）計(jì)數(shù)光子數(shù)量就可檢測(cè)蛋白質(zhì)的濃度。因?yàn)榇税l(fā)光過(guò)程是十分短暫（整個(gè)過(guò)程在 2 秒鐘內(nèi)完成），樣品必須直接放在光度計(jì)內(nèi)部光 子探測(cè)器前面。蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸都可以用吖啶酯標(biāo)記。

吖啶酯發(fā)光標(biāo)記注意事項(xiàng)

吖啶酯有多種類型，常見(jiàn)的各種吖啶酯、吖啶磺酰胺、吖啶磺酸鹽等等都屬于吖啶酯類化合物。需要注意的是，溶解吖啶琥珀酰亞胺酯時(shí)，使用的 DMF 必須嚴(yán)格無(wú)水，防止吖啶酯水解.不使用時(shí)，干燥密封-20℃保存。

如果是不含-NHS 的吖啶羧酸需要加入縮合劑 EDCI 等，才能與含胺基的蛋白發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)。吖啶酰肼含有游離氨基，所以更加適用直接偶聯(lián)含有醛基的多糖,核酸或者蛋白質(zhì)等。

吖啶酯發(fā)光優(yōu)勢(shì)

1.針對(duì)傳統(tǒng)吖啶酯，在其結(jié)構(gòu)上進(jìn)行了修飾，增大了位阻，增強(qiáng)了抗水解性，如在室溫下，在 pH 為 7.0 的 PB 緩沖液中很穩(wěn)定。

2.光釋放快速集中、發(fā)光效率高、發(fā)光強(qiáng)度大，易與蛋白質(zhì)聯(lián)結(jié)且聯(lián)結(jié)后光子產(chǎn)率不減少。

3.發(fā)光反應(yīng)干擾因素少，標(biāo)記物穩(wěn)定( 在2 - 8 ℃下可保存數(shù)月之久)

德晟科技研發(fā)生產(chǎn)的吖啶酯屬于自主研發(fā)生產(chǎn)，對(duì)吖啶酯的研究開(kāi)發(fā)投入了大量精力，所以在質(zhì)量上的把控更加的嚴(yán)格。目前公司產(chǎn)品已銷往全球一百多個(gè)國(guó)家，99%以上客戶都收到好評(píng)復(fù)購(gòu)，產(chǎn)品質(zhì)量?jī)?yōu)，價(jià)格有優(yōu)惠，有意向了解可以來(lái)電咨詢，德晟歡迎您的來(lái)電。