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首頁 > 供應產品 > WB實驗失敗是否與緩沖劑有關
WB實驗失敗是否與緩沖劑有關
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品牌 德晟
過期 長期有效
更新 2021-07-14 11:52
 
詳細信息

近期了解到有實驗人員反應,作WB實驗有失敗的情況,懷疑與實驗中使用的緩沖劑有關,可能是緩沖劑未滅菌或配制成溶液后感染了細菌導致的。那么WB實驗的失敗是否真的與緩沖劑染菌造成的呢?

WB實驗即western blot蛋白質印跡實驗,或稱為免疫印跡實驗,是將電泳分離后的細胞或組織中蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術。WB實驗失敗的原因有很多,緩沖劑只是其中一個影響因素。

緩沖劑長菌對WB實驗影響

WB實驗通常是不要求在無菌條件下操作的,因為本實驗基本不會受到影響。基本可以確定,WB實驗的失敗不會是因為緩沖劑染菌導致,是其它原因。緩沖劑里即使有殘留的細菌,其含有的蛋白質量是極少的,如果對實驗產生影響,那么緩沖劑肯定早已經嚴重變質了,會直接注意到而不會使用。緩沖劑在發生這么嚴重的污染之前應該早就用完了。

緩沖劑離子強度對WB實驗影響

緩沖劑未滅菌雖然對WB實驗不會造成影響,不過其離子強度不合適有可能會造成WB實驗失敗。實驗中通常是采用Tris作為緩沖劑,它有著較低的離子強度,不過在電泳過程中,通常會增加氯化鈉,以提高離子強度加快電泳速率。而離子強度過高的話可能造對蛋白質造成影響,使WB實驗失敗。另外也要控制好緩沖劑pH值,這對WB實驗至關重要。

所以說緩沖劑未滅菌或染菌與WB實驗失敗關系不大,更應該考慮緩沖劑的離子強度、pH值是否合適或者樣品制備等問題。德晟是生物緩沖劑原料,可大量提供TrisCAPSMOPS等緩沖劑原料。

 

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