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武漢德晟生化科技有限公司  

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生物緩沖液在蛋白純化中的選擇
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品牌 德晟
過期 長期有效
更新 2021-07-16 14:29
 
詳細信息

蛋白質的結構和功能需要在合適的pH值環境中才能維持,因此在蛋白的制備及純化過程中,生物緩沖液的選擇非常重要,只有合適的緩沖液才能保證蛋白的活性和結構穩定。

蛋白純化過程緩沖液作用

用于蛋白純化的緩沖劑有很多種,在維持體系的pH同時,要保證蛋白在純化過程中不能失活,或者是盡量減少蛋白失活的量,在蛋白純化的每一個步驟中都要保持蛋白的可溶性和活性。

蛋白純化緩沖液要求

蛋白純化過程中的緩沖液既要防止蛋白降解,也要防止蛋白聚合,其對實驗結果影響顯著。在選擇和試劑緩沖液時應考慮以下幾個因素:pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩定劑。其中每一個因素都要根據所純化的目標蛋白進行優化,并以目標蛋白的活性作為優化的評估標準。

了解蛋白穩定性條件

蛋白的種類很多,不同的蛋白適應的pH值有差異,需根據其最適pH值來選擇緩沖液。很多時候采用的是pH7.4,這是模仿的生物條件,大多數蛋白在這個pH值下是穩定的。不過也有一些是例外的,這就需要調整pH值,以保持蛋白是可溶的且不會降解。

蛋白純化常用的緩沖劑

蛋白純化過程中常用的緩沖液有TrisTricineBis-TrisMOPS等,其中普遍的是用Tris,它的緩沖范圍接近生理pH值,且有著較低的離子強度,是蛋白質的良好溶劑,能保證蛋白的穩定性。需注意的是配制緩沖液時,盡量避開目標蛋白的等電點pl。因為蛋白在其等電點的pH溶液中表面沒有靜電荷,帶百分子間排斥力減小,容易聚集,溶解度降低。

現在需純化的蛋白的適應pH值、等電點、以及緩沖液的緩沖范圍都是可以查到的,直接按對應要求匹配即可。德晟是體外診斷試劑生產型企業,可提供大包裝的生物緩沖劑TrisMOPSBicine等。

 

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