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使用生物緩沖劑時需要注意哪些事項?
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品牌 德晟
過期 長期有效
更新 2021-09-16 15:42
 
詳細信息

為實驗選擇合適的生物緩沖液Tris,Mops,Hepes,Pipes等)可能很棘手,緩沖區(qū)選擇過程就像玩“猜猜誰”。像游戲一樣,一般來說,可以從非常廣泛的緩沖區(qū)列表開始,然后慢慢地提出問題和研究答案以縮小選擇范圍。

在下文將給大家提供一些選擇生物緩沖液的注意事項。

1. 確定實驗的pH

在許多實驗中,需要更改條件以使蛋白質在溶液中保持完美狀態(tài)。假設在pH 7.4的條件下進行了模擬生物條件的實驗,但是蛋白質在此pH值下不穩(wěn)定,因此需要優(yōu)化這種情況。要注意的是,目標pH值通常離蛋白質等電點(pI)大約一個pH單位(有時稍遠)。pI是給定的分子或蛋白質不帶凈電荷的pH值。當?shù)鞍踪|達到其pI時,它的溶解度就不那么高。

2. 考慮不必要的緩沖區(qū)交互:

決定使用哪個緩沖區(qū)的另一個重要步驟是確定是否存在負緩沖區(qū)交互。舉個例子,如果正在使用一種酶,那么有機緩沖液可能會影響酶功能的好壞。

3. 實驗時需要考慮到的一些問題:

就像游戲一樣,可以提出一些問題,以確保獲得正確的緩沖。舉個例子,1.溶液中是否存在可能于緩沖液絡合的金屬?2.目標蛋白是一種酶嗎?它屬于哪一類?3.配體結合,蛋白質穩(wěn)定性或電泳的離子強度要求是什么?像這樣的一些問題根據(jù)實驗時的具體情況來提問并思考,將進一步幫助找到合適的生物緩沖液(Tris,Mops,Hepes等)

4. 考慮下游實驗時會有什么影響:

研究人員經(jīng)常遇到的一個絆腳石是,他們將從緩沖區(qū)開始,并發(fā)現(xiàn)它不適用于下游應用程序。舉個例子,已知Tris會對Bradford assay產(chǎn)生負面影響。其他生物緩沖液會對質譜產(chǎn)生負面影響。不幸的是,在執(zhí)行第1步和第2步之后,可能已經(jīng)縮小了緩沖區(qū)的范圍,只是發(fā)現(xiàn)它在將來可能無法很好地工作。在這種情況下,必須進行一些研究以找到合適的替代方法。但是,既然已經(jīng)縮小了所需的特征,那么進行這項研究就會容易一些。

5. 尋找合適的緩沖區(qū):

當知道要使用什么緩沖區(qū)時,就應該區(qū)采購緩沖區(qū)了。對于大多數(shù)研究人員而言,底價和純度基本上是在哪里購買緩沖液的重要標準。當然,也可以去找大品牌的公司,那么將會獲得合適的產(chǎn)品。但是,其價格也一定不會便宜。取而代之,湖北新德晟材料有限公司具有不斷增長的高質量緩沖液產(chǎn)品,而且價格將會是您心里的合適價位。

湖北新德晟材料有限公司不僅提供出色的產(chǎn)品,而且還提供專業(yè)的技術支持與定制服務。如想了解更多,可進入德晟公司官網(wǎng)了解詳情。

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