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現(xiàn)貨 Human PKCa ELISA Kit

 
 
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型號(hào) 96T
過(guò)期 長(zhǎng)期有效
更新 2015-04-27 09:43
 

上海武昊經(jīng)貿(mào)有限公司

企業(yè)會(huì)員第14年
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  • 上海
  • 上次登錄 2015-04-27
  • elisa (女士)  
詳細(xì)說(shuō)明
   ELISA 貨號(hào):071918Hu
ELISA 英文名:ELISA Kit for Protein Kinase C Alpha (PKCa)
ELISA 中文名:
蛋白激酶Cα(PKCα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
適用生物:Homo sapiens (Human)
產(chǎn)品應(yīng)用:ELISA(僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!)
質(zhì)量認(rèn)證:SGS,ISO 9001:2008;ISO 13485:2003

[操作步驟]

1、 加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔、空白孔。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔7孔,依次加入100μL不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(見試劑準(zhǔn)備2)。空白孔加100μL(見試劑準(zhǔn)備第二步最后一管),余孔加待測(cè)樣品100μL,酶標(biāo)板加上覆膜,37oC溫育2小時(shí)。

2、 棄去液體,甩干,不用洗滌。

3、 每孔加檢測(cè)溶液A工作液100μL(臨用前配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37oC溫育1小時(shí)。

4、 棄去孔內(nèi)液體,每孔用350μL的洗滌液洗滌,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),重復(fù)洗板3次。最后一次洗滌后,要把孔內(nèi)的洗滌液完全甩干。自動(dòng)洗板機(jī)亦可。

5、 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(臨用前配制)100μL,加上覆膜,37oC溫育30分鐘。

6、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟4。

7、 每孔加底物溶液90μL,酶標(biāo)板加上覆膜,37oC避光顯色(反應(yīng)時(shí)間控制在15-25分鐘,不要超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯時(shí),即可終止)。

8、 每孔加終止溶液50μL,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現(xiàn)顏色不勻一,請(qǐng)輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板以使溶液混合均勻。

9、 在確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后,立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(O.D.值)。

注意

1、 試劑準(zhǔn)備:準(zhǔn)備一次實(shí)驗(yàn)所需要的酶標(biāo)條,其它的可從微孔板上拆下,密封,按照說(shuō)明書要求保存,以備下次使用。

2、 加樣:實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。加樣時(shí)注意不要有氣泡,將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。加樣或加試劑時(shí),第一個(gè)孔與最后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。因此,一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)最好控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

3、 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實(shí)驗(yàn)時(shí)請(qǐng)將加上蓋或覆膜的酶標(biāo)板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā),洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài),同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的溫育時(shí)間和溫度。

4、 洗滌:充分的洗滌非常重要,在每次洗滌過(guò)程中,都要將洗滌液完全甩干。洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響最后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí) 驗(yàn)過(guò)程中。

5、 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘觀察一次),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。

6、 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

7、 如果實(shí)驗(yàn)室內(nèi)濕度低于60%,推薦使用加濕器提高濕度水平。


僅供參考,以隨貨說(shuō)明書為準(zhǔn),更多產(chǎn)品如酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISAkit;ELISA 試劑盒);化學(xué)發(fā)光試劑盒(CLIA試劑盒;CLIAkit) ;抗體(antibody);蛋白(protein);鱟試劑;內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品;內(nèi)毒素指示劑;無(wú)熱原檢查用水;無(wú)熱原吸咀;紫外燈;色譜儀;色譜柱等詳情信息請(qǐng)登錄上海武昊公司官方網(wǎng)站***.wuhaosh.* // 或致電021-60875268 // 咨詢或QQ:1292512665 // 或wuhao@wuhaosh.*


上海武昊公司 ELISA試劑盒優(yōu)惠促銷開始啦

優(yōu)惠時(shí)間:2013年4月1日至2013年10月31日

購(gòu)買壹個(gè)試劑盒,送水筆壹支+話費(fèi)充值;
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多買多送,禮品有限,送完為止。

購(gòu)買抗體免費(fèi)得陽(yáng)性對(duì)照, 買蛋白免費(fèi)得Marker外;金額在1000元以下還可得水筆一支,便條本1本,金額在1000元以上可享有ELISA試劑盒同等的優(yōu)惠。

本次活動(dòng)僅針對(duì)廣大科研工作者,禮品在收到貨款后另行寄出,最終解釋權(quán)歸上海武昊公司所有。

上海武昊目前優(yōu)惠促銷品牌: abcam  ; abgent ; CST; BD ; eBioscien  ; Epitomics ; RnD ; USCN 等; 產(chǎn)品涉及種類:免疫組化抗體,流式抗體及Treg試劑盒,WB抗體,標(biāo)簽抗體,二抗,ELISA試劑盒;鱟試劑,細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品,內(nèi)毒素指示劑,無(wú)熱原吸咀,細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水等等,歡迎您的咨詢。再次感謝!

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