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酶聯(lián)免疫底物Trinder's試劑與TMB

 
 
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更新 2021-09-29 16:04
 

武漢德晟生化科技有限公司

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酶聯(lián)免疫分析是體外診斷技術(shù)中使用普遍且應(yīng)用時(shí)間比較久的一種分析檢測(cè)技術(shù),其用到的設(shè)備儀器簡(jiǎn)單,各種實(shí)驗(yàn)環(huán)境下都可以操作,靈敏度也比較高,具有多方面的優(yōu)勢(shì)。酶聯(lián)免疫所使用的底物除了大家熟知的ELISA中的TMB之外,還有新型Trinders試劑等。

色原底物新型Trinders試劑

新型Trinders試劑是在傳統(tǒng)Trinders試劑的基礎(chǔ)上通過官能團(tuán)的取代優(yōu)化改進(jìn)而來,穩(wěn)定性和靈敏度更好。它的種類很多,目前德晟已經(jīng)研發(fā)并銷售的有9種,包括TOOSTOPSMAOSADPS等等。不同的Trinders試劑的氧化產(chǎn)物,其蕞大吸收光波長(zhǎng)和摩爾吸光系數(shù)不一樣,分別適用于不同生化指標(biāo)的檢測(cè)。

Trinders試劑檢測(cè)原理

Trinders試劑屬于HRP的氧化耦聯(lián)色原底物對(duì),和4-氨基安替(4-AAP)比鄰耦聯(lián)氧化顯色(也可用2-甲基-2苯并噻唑啉酮腙MBTH,但應(yīng)用較少)。在H202存在下,4-氨基安替比林和新型Trinders試劑經(jīng)HRP作用縮合形成紅色的醌亞胺類物質(zhì),其在特定波長(zhǎng)處有最大吸收,大于540nm,檢測(cè)波長(zhǎng)紫外區(qū),干擾少。

色原底物TMB

TMB即四甲基聯(lián)苯胺,是ELISA試劑盒中所使用的酶聯(lián)免疫底物。它屬于一種氧化還原色原底物,其氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長(zhǎng)450nm(吸收光為藍(lán)光)處有蕞大消光系數(shù)。當(dāng)酶HRP量少,過氧化氫溶液和TMB過量時(shí),則形成藍(lán)色的陽(yáng)離子根,降低pH,即可使藍(lán)色的陽(yáng)離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌。***作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min1%SDS作為終止劑可使鮮藍(lán)色24h內(nèi)保持不變,但有較強(qiáng)的褪色作用。

新型Trinders試劑與TMB相比,成本更高一些,不如TMB適用廣泛,不過它們的吸收波長(zhǎng)要更高,MAOS試劑更是達(dá)到了630nm。除了上述的色原底物之外,德晟還可以提供檢測(cè)中所需要的各種酶制劑。

 

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