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在電泳實驗中,會用到緩沖劑來維持電泳穩(wěn)定系統(tǒng)恒定PH值的必要條件,因為在電泳實驗時它的正極與負極會發(fā)生電解反應,正極會發(fā)生氧化反應,負極會發(fā)生還原反應。長時間的電泳會使正極變酸,負極變堿。而緩沖液能使溶液兩極的pH保持基本不變。還會使溶液具有一定的導電性,有利于DNA分子的遷移。
說到這里很多人都想到了生物緩沖液MOPS (3-嗎啉丙磺酸),它屬于Good’s緩沖劑,在水中有良好的溶解性,緩沖范圍在6.5-7.9之間,可作為二維凝膠電泳中等電聚焦電泳(IEF)的電解質系統(tǒng)成分;還可應用于Northern雜交,作為RNA的分離和轉膜時的緩沖液。
電泳緩沖中 常用的10×MOPS Buffer配制方法如下:
(1)稱量41.8 g MOPS,溶解于約700mL DEPC處理水中;
(2)使用2 N NaOH 調節(jié)pH值至7.0;
(3)向溶液中加入DEPC處理的1M NaOAC 20mL、0.5M EDTA(pH8.0) 20mL;
(4)定容至1 L,用0.45 μm 濾膜過濾除去雜質,室溫避光保存。
除了MOPS緩沖液之外用于電泳中的生物緩沖劑還有許多,它們之間也有一定的區(qū)別,適用于各種電泳中。而在現(xiàn)在的市場上,生物緩沖劑的商家眾多,產(chǎn)品規(guī)格與質量參差不齊。德晟為專業(yè)生產(chǎn)生物緩沖劑的廠家,現(xiàn)在生產(chǎn)的生物緩沖劑類產(chǎn)品有TRIS、 HEPES、 TAPS 、MOPS、 CAPS、 BICINE、 EPPS、 PEP等一系列生物緩沖液,目前成立已有十多年,擁有十分豐富的研發(fā)生產(chǎn)經(jīng)驗與產(chǎn)品知識,可為客戶提供大量技術支持與售后保障。如有需要歡迎隨時聯(lián)系我們!