|
|||||||||||||||||||||||||||
HEPES
HEPES是兩性離子Good's緩沖液，在6.8至8.2的pH范圍內有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該緩沖液可用于多種生物的細胞培養基中。它也可用作蛋白質研究中的結合緩沖液，用于陽離子交換洗脫實驗中，以及在凝膠電泳中用作運行緩沖液。
HEPES的制備步驟：
要制備1升1M HEPES緩沖溶液，請將238.30 g HEPES溶解 在750 mL水中。使用10N氫氧化鈉調節至所需的pH。
注意事項：
HEPES可溶于水，價格便宜，并且通常具有生物惰性。但是，它確實參與了產生自由基的氧化還原反應，并干擾了DNA和限制性內切酶之間的反應，但是由于空間位阻，其干擾程度小于Tris。同樣重要的是要注意，當使用異質連接蛋白通道時，不應使用HEPES，因為它會抑制其功能。
PIPES
PIPES是哌嗪緩沖液家族的一員，與HEPES屬于同一家族。它是兩性離子Good's緩沖液，在6.1至7.5的pH范圍內有效。由于pH范圍與HEPES略有不同，PIPES的濃度僅為HEPES濃度的一半。該緩沖劑不會與金屬絡合，因此可用于含金屬離子的溶液。
PIPES的制備步驟：
要制備1升1M PIPES游離酸緩沖溶液，請將302.37g PIPES游離酸添加到600 mL 水中。使用10N氫氧化鈉調節至所需的pH值。
注意事項：
直到溶液的pH值升高到6.5以上時，PIPES的游離酸才容易溶解，但是PIPES的鈉鹽很容易溶解。如果使用的是游離酸形式的緩沖液，請使用氫氧化鈉將其轉化為鈉鹽，以提高在較低pH下的溶解度。像HEPES一樣，PIPES不適用于涉及氧化還原反應的實驗，因為它會導致自由基的形成。
